El kit de TriniCLOT Fibrinogen está diseñado para la
determinación cuantitativa del fibrinógeno en plasma.
RESUMEN:
La mayoría de los métodos para determinar la concentración de
fibrinógeno asumen que la trombina convertirá cuantitativamente el fibrinógeno
a fibrina. La estimación de la concentración en base al peso o contenido
proteico del coágulo de fibrina formado puede estar sujeta a importantes
errores debido a la presencia de inhibidores que provocarán la formación de
coágulos pequeños o ausencia de coágulos. La plasmina también puede producir
lisis significativa del coágulo formado antes de que pueda ser completada la
determinación final de fibrinógeno. Se han descrito procedimientos alternos
basados en la precipitación con sulfato de amonio5,6 pero estos no
correlacionan con los tiempos de coagulación de la trombina cuando los niveles
de fibrinógeno están por debajo de 100 mg/dl (1.0 g/L)
PREPARACION DEL REACTIVO:
Reconstituya el TriniCAL Fibrinogen con 1,0 ml de agua
destilada o desionizada. Tape denuevo el vial y déjelo reposar hasta que esté
completamente disuelto. Inviértalo suavemente para mezclarlo. NO LO AGITE.
Reconstituya el reactivo de trombina con 6,0 ml de agua
destilada o desionizada. Tape de nuevo vial y déjelo reposar hasta que esté
completamente disuelto. Inviértalo periódicamente. NO LO AGITE. El tampón de imidazol se suministra como un
líquido y no requiere preparación antes de su uso.
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
Se deben seguir las precauciones normales establecidas para
el manejo de reactivos en el laboratorio. Deseche los residuos de acuerdo con
la legislación local, nacional y regional.
El TriniCAL Fibrinogen es un MATERIAL QUE PODRÍA SUPONER UN
RIESGO BIOLÓGICO.
Métodos de prueba aprobados indican que los materiales
originales de los que deriva este product muestran resultados negativos de
AgHBs, así como anticuerpos contra el VHC, el VIH-1 y el VIH-2. Sin embargo,
como no hay ningún método de prueba que pueda garantizar por completo que no
existan agentes infecciosos, este producto deberá manejarse cumpliendo las
mismas precauciones de seguridad que cuando se manipula material potencialmente
infeccioso. El reactivo de trombina es
NOCIVO. Produce daños si entra en contacto con la piel o si se ingiere. Produce
irritación en los ojos, en el sistema respiratorio y en la piel. En caso de
contacto con los ojos, lávelos inmediatamente con abundante agua y consulte a
un médico. Lleve ropa de protección adecuada. La ausencia de vacío al abrir un
vial de reactivo de trombina o TriniCAL Fibrinogen, o la incapacidad para
obtener valores reproducibles son posibles signos de deterioro del producto.
El tampón de imidazol contiene acida de sodio, que es NOCIVA.
Produce daños si entra en contacto con la piel o si se ingiere. El contacto con
ácidos libera un gas muy tóxico. Mantenga el contenedor herméticamente cerrado.
Lleve ropa y guantes protectores adecuados. MATERIAL CON RIESGO BIOLÓGICO
POTENCIAL. La acida de sodio puede reaccionar con piezas de plomo y cobre,
dando como resultado acidas metálicas altamente explosivas. Evite la
acumulación de acidas. Deseche el tampón de imidazol si hay signos de
crecimiento microbiano.
Método de BBL Fibrometer:
Curva de calibración y prueba del plasma del paciente:
1. Reconstituya el reactivo de trombina y manténgalo a
temperatura ambiente (18-25°C) durante la prueba.
2. Añada 0,2 ml (200 µl) de la muestra de plasma diluida a
una copa de Fibrometer.
3. Incube durante 1–3 minutos a 37°C. (No más de 5 minutos.)
4. Después de la incubación, extraiga rápidamente 0,1 ml (100
µl) del reactivo de trombina en la copa de Fibrometer y, al mismo tiempo,
active el cronómetro.
5. Anote los resultados del tiempo de coagulación en
segundos.
6. Extrapole la concentración a partir de la curva de
calibración.
Las sondas deben lavarse y secarse entre una prueba y otra
para evitar el arrastre de proteínas plasmáticas activadas. Para una limpieza
eficaz, las sondas de Fibrometer deben sumergirse en agua y frotarse CON FUERZA
después de cada determinación. No basta con secarlas con papel secante.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
La dilución más baja recomendada de la prueba es 1:3. No se
puede emplear plasma sin diluir, ya que los inhibidores y las sustancias que
interfieren pueden afectar a la precisión de los resultados.
El tiempo de medición más corto para el instrumento KC 1/KC 4
es de unos 4,5 segundos. Cuando obtenga un tiempo de coagulación de 4,5
segundos, vuelva a ejecutar la muestra con una dilución diferente.
Los resultados no se ven excesivamente afectados por niveles
terapéuticos de heparina habituales (hasta 3,0 USP U/ml) detectados en
pacientes anticoagulados. Se ha indicado que los productos de degradación de la
fibrin (PDF) pueden inhibir la acción de la trombina sobre el fibrinógeno y la
polimerización de la fibrina. Los PDF tienen un efecto mínimo en un ensayo de
fibrinógeno con niveles normales de fibrinógeno. En concentraciones de
fibrinógeno por debajo de 150 mg/dl (1,5 g/L), una concentración de PDF
superior a 100 g/ml puede inhibir en mayor medida el ensayo de Clauss.
RESULTADOS:
MUESTRA 1: 1 MINUTO
MUESTRA 2: 1 MINUTO, 7 SEGUNDOS.
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